过敏反应最主要的机制是由特定物质引发的体内特异性的免疫反应,主要是由IgE介导的抗原抗体反应,少部分为IgG介导的抗原抗体反应(如右旋糖苷引发的过敏反应)。抗原抗体反应启动后,将立即引起组胺、类胰蛋白酶、白介素、缓激肽和血小板活化因子等炎性介质的释放,从而导致皮肤和黏膜、气道、呼吸和循环系统体征和症状的出现[1]。还有一类为类过敏反应,其机制不涉及免疫球蛋白介导的抗原抗体反应,主要包括非特异性补体系统活化、激肽-激肽释放酶系统活化、肥大细胞或嗜碱性粒细胞活化和介质释放等。本文就围术期过敏原检测的主要方法包括药物激发试验、皮肤试验、嗜碱性粒细胞活化试验、类胰蛋白酶检测和特异性IgE检测进行介绍。

药物激发试验

药物激发试验被认为是药物过敏调查的金标准,是通过模拟自然发病条件,以少量致敏原开始,逐渐增大剂量引起变态反应发作,用以确定变应原的试验。对于有药物过敏史的患者,在皮肤检测及其他生物学检测均为阴性时,可考虑进行激发试验[2,3]。药物激发试验是高风险的检测手段,必须准备好抢救设备,由专业人员操作才能进行。

皮肤试验

皮肤试验包括点刺试验(skin prick test,SPT)、皮内试验(intradermal tests,IDTs)和斑贴试验。皮肤试验的原理是当有某种变应原进入皮肤时,对某些物质有速发型过敏反应的患者,立即特异性地引起皮肤内的肥大细胞脱颗粒,释放组胺等活性物质,导致局部毛细血管扩张(红晕),毛细血管通透性增强(水肿、风团)[2,4,5]。阳性者表示对该抗原过敏,该方法相对简便易行。皮肤试验是检测IgE介导的过敏反应的金标准。皮内试验较点刺试验更敏感,特异性较低,而且更易于触发全身的过敏反应,所以它的操作需在点刺试验之后再进行。

嗜碱性粒细胞活化试验(Basophil activation tests)

嗜碱性粒细胞活化试验是同时检测IgE介导或非IgE介导的过敏反应的方法[2]。其原理是依赖于嗜碱性粒细胞膜表面活化和脱颗粒标志物的流式细胞术分析,通过检测嗜碱性粒细胞上活化或颗粒产物(如CD63,CD203c),反映嗜碱性粒细胞的活化程度。

类胰蛋白酶(tryptase)检测

类胰蛋白酶是肥大细胞中性丝氨酸蛋白酶。在体内主要有a和ß两种形式存在,每一种又包括多种亚型。成熟的ß-类胰蛋白酶储存在肥大细胞的颗粒中。类胰蛋白酶水平超过25 mg/L(25 ug/ml)时即有过敏反应的发生。过敏反应发生时类胰蛋白酶依赖钙通道释放,1 ~ 2小时达到高峰,采血时间:过敏反应发生即刻,过敏反应发生后1h ~ 2h以及24h,其中以24h为基础值。

特异性IgE(drug-specific IgE)检测

特异性IgE检测方法是指使用IgE免疫测定法,通过定量检测药物(半抗原)载体-抗体复合物的方法,来检测药物特异性IgE的定量。药物(半抗原)载体偶联物与固相偶联,后者与患者血清一起孵育,随后用抗人IgE二级抗体检测特异性IgE结合量[2]。在过敏反应后早期(< 4周)时,皮肤试验可能存在特异性不足无法检测过敏原的问题,sIgE的检测可辅助检测过敏原。

参考文献:

[1] Ebo DG, Clarke RC, Mertes PM, Platt PR, Sabato V, Sadleir PHM. Molecular mechanisms and pathophysiology of perioperative hypersensitivity and anaphylaxis: a narrative review[J]. Br J Anaesth,2019;123(1):e38-e49.

[2] Takazawa T, Sabato V, Ebo DG. In vitro diagnostic tests for perioperative hypersensitivity, a narrative review: potential, limitations, and perspectives[J]. Br J Anaesth,2019;123(1):e117-e125.

[3] Garvey LH, Ebo DG, Krøigaard M, et al. The use of drug provocation testing in the investigation of suspected immediate perioperative allergic reactions: current status[J]. Br J Anaesth,2019;123(1):e126-e134.

[4] Dewachter P, Chollet-Martin S, Mouton-Faivre C, et al. Comparison of Basophil Activation Test and Skin Testing Performances in NMBA Allergy[J]. J Allergy Clin Immunol Pract,2018;6(5):1681-1689.

[5] van der Poorten MM, Walschot M, Faber M, et al. Reliability of Early and Late Testing for Suspected Perioperative Hypersensitivity[J]. J Allergy Clin Immunol Pract, 2022 Apr;10(4):1057-1062.e2.